鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定

• 作者: 刘宇卓 刘晓燕 李银 杨婧 谢星星 赵冬敏 韩凯凯 黄欣梅
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 鹅坦布苏病毒 E蛋白 结构域Ⅰ 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 2259-2263
• 页数: 5页
• 分类号: S858.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.12.2259

摘要

[目的]明确鹅坦布苏病毒(GTUMV)E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性,为进一步研究GTMUV E蛋白结构的生物学特性、免疫学功能等奠定基础.[方法]通过人工合成方法获得GTMUV E蛋白结构域Ⅰ的编码基因(EI基因),并与携带GST标签的pGEX-4t-1载体连接,转入大肠杆菌后经诱导表达获得融合蛋白,并以Western blotting鉴定融合蛋白是否有免疫原性.[结果]合成获得的E1基因片段为411 bp,将其插入pGEX-4t-1载体可构建重组表达质粒pGEX-4t-1-EI.阳性重组菌经1 mmol/L IPTG诱导5h后,融合蛋白的表达量达最高峰,且以包涵体形式存在,分子量约41.0 kDa.Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与GST标签抗体和E蛋白阳性血清均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带.[结论]GTMUVE蛋白结构域Ⅰ可在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于GTMUV血清学检测试剂盒的研发.