新型鸭呼肠孤病毒σC基因原核表达及其抗原性的初步研究

• 作者: 李兆龙 林锋强 王劭 王锦祥 程晓霞 陈仕龙 陈少莺
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新型鸭呼肠孤病毒 σC蛋白 原核表达 Western blotting 抗原性
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 310-313
• 页数: 4页
• 分类号: S852
• 字数: 2911字
• 语种: 中文

摘要

应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒σC基因，分析σC蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒（NDRV） NP03株S1基因序列，针对σC基因设计并合成1对特异性引物，用RT-PCR扩增该基因，并将此片段克隆到原核表达载体 pET-30a （＋）上，将序列正确的重组质粒命名为 pET-NDRV-σC ，转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，1.0 mmol· L -1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示，RT-PCR扩增得到966 bp的目的片段；表达产物经 SDS-PAGE分析，获得了与预期相符的约41.3 ku的条带，重组蛋白主要以包涵体形式存在；Western blotting 分析显示，重组蛋白能与 NDRV 阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得NDRV σC蛋白，并证明其具有免疫反应性。