人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用

• 作者: 季育华 彭奕冰 支立明 李敏 潘宁 赵缜
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒pp65抗原血症 外周血多形核白细胞 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学检验论著
• 页码范围: 36-39
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2004.01.014

摘要

目的建立人巨细胞病毒抗原pp65(HCMVpp65)血症特异、灵敏和低成本的酶免组化和荧光免疫组化方法,以利于临床推广应用.方法以HCMV-AD169感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)爬片作阳性对照,选择试剂和材料组建试剂盒,并与商品化的同类试剂盒作比较,建立人外周血多形核白细胞(PMNLs)中HCMVpp65抗原阳性细胞的检测方法,然后再用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法做相应考评.结果我们建立的HCMVpp65抗原血症检测法能成功地检出PMNLs中的pp65阳性细胞.其可检测限分别为102 pfu/ml的AD169攻击24 h后的HELF细胞爬片和3～5个pp65阳性细胞/2×105 PMNLs;用高相对分子质量(500 000)的葡聚糖能快速、有效地分离PMNLs;用4%中性多聚甲醛固定的细胞片,于-20 °C或以下可长期保存(≥6个月),而且pp65抗原性稳定.结论自建的试剂盒与同类进口试剂盒相比,检测pp65的结果差异无显著性,并与FQ-PCR的检测结果相一致,其检测特异、灵敏、操作简单、费用低廉,适宜临床实验室推广应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭奕冰	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	18	213	8.0	14.0
2	赵缜	上海瑞金医院集团闵行医院检验科	14	111	6.0	10.0
3	李敏	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	54	335	10.0	15.0
4	季育华	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	32	220	10.0	13.0
5	潘宁	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	4	18	2.0	4.0
6	支立明	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	1	13	1.0	1.0