虫媒病毒性脑炎M-RT-PCR诊断方法的建立及应用

• 作者: 付士红 刘卫滨 宋宏 宋宗明 梁国栋 王环宇 王鹏富 赵洪丽
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 虫媒病毒性脑炎 多重逆转录聚合酶链式反应 分子流行病学调查
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 免疫检测
• 页码范围: 317-323
• 页数: 7页
• 分类号: R4
• 字数: 6221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.04.022

摘要

目的建立常见嗜神经性虫媒病毒(arboviruses)分子生物学诊断方法及分子流行病学调查模型.方法通过生物信息学方法筛选3对常见嗜神经性虫媒病毒特异基因扩增引物, 建立多重逆转录聚合酶链式反应(multiplex reverse transcription-PCR, M-RT-PCR)体系.考察了体系的特异性、敏感性和广谱性并使用建立的M-RT-PCR体系对我国新分离的3株病毒进行鉴定.结果 M-RT-PCR体系针对黄病毒及甲病毒敏感性达到100PFU,针对加利福尼亚脑炎病毒组达到1000PFU.利用M-RT-PCR体系证实3株新分离嗜神经性虫媒病毒株中2株为蜱传脑炎病毒远东型,另1株为日本脑炎病毒Ⅰ型.结论建立了针对嗜神经性虫媒病毒的分子生物学鉴定方法,该方法能够准确分析黄病毒属嗜神经性虫媒病毒(日本脑炎病毒、蜱传脑炎病毒和西尼罗病毒)的基因型、地理来源、进化及亲缘关系等,能够鉴定并区分甲病毒属不同病毒(东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒和委内瑞拉马脑炎病毒),能够鉴定加利福尼亚脑炎病毒组病毒.