永生大鼠肝星状细胞系的建立及鉴定

• 作者: 徐芹芳 李定国 汪余勤 潘勤
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1337-1340
• 页数: 4页
• 字数: 3630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.06.020

摘要

目的:建立永生性大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)系.方法:采用改良胶原酶原位灌注法消化肝脏,经Nycodenz密度梯度离心分离、鉴定成年Sprague-Dawley大鼠的HSC.然后通过细胞克隆建立HSC系(HSC-PQ)并传代培养.结合细胞动力学、光镜、透射电镜及免疫细胞化学技术检测HSC-PQ系的倍增时间、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及结蛋白表达、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成等表型特征.结果:分离获得的HSC约为2X107细胞/只大鼠,细胞成活率＞95%,纯度＞90%,培养2 wk后几乎所有HSC均已活化.在此基础上经细胞克隆所得的HSC-PQ系表型类似成纤维细胞,倍增时间约75 h,可表达结蛋白、α-SMA以及除Ⅳ型胶原外的多种ECM成分(Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白、层粘连蛋白等),且传代过程中增生、ECM表达等特性均保持稳定.该细胞系已在体外培养32代(1 a以上),提示其具有永生性.结论:已成功建立永生性大鼠HSC系,该细胞系的基本特征与活化的原代HSC相似.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘勤	上海第二医科大学附属新华医院消化内科	11	117	6.0	10.0
2	李定国	上海第二医科大学附属新华医院消化内科	199	2157	25.0	37.0
3	徐芹芳	上海第二医科大学附属新华医院消化内科	42	523	11.0	21.0
4	汪余勤	上海第二医科大学附属新华医院消化内科	17	166	8.0	12.0