噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌方法学研究

• 作者: 倪莲娣 李建农 翁心华 胡忠义 董惠贤 钟敏 靳安佳
• 来源期刊: 中华结核和呼吸杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌噬菌体 分枝杆菌,结核 诊断技术和方法
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-805
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 5156字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1001-0939.2004.12.005

摘要

目的建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法,探讨最佳检测条件.方法应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌,比较各种检测条件对测定结果的影响,并将所建方法用于痰标本检测,结果与BIOTEC Lab公司产品比较.结果 1×109噬菌斑形成单位(PFU)/ml的噬菌体,37℃感染 60 min可检出200～500条/ml结核分枝杆菌.杀毒剂100 mmol /ml,室温作用5 min可完全灭活受试噬菌体.指示细胞浓度在1×108条/ml 时,形成的噬菌斑清晰,便于计数.加热灭活的细菌和指示细胞不被噬菌体感染.H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌参考菌株检测结果均为阳性,7种非分枝杆菌和16种常见非结核分枝杆菌检测结果为阴性,4种非结核分枝杆菌(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>1×105条/ml)检测结果为阳性.重复试验结果表明,本法批间和批内变异系数均<15%.痰标本氢氧化钠-半胱氨酸液化方式的阳性检出率为94%(49/52),显著高于氢氧化钠液化结果的62%(32/52,χ2＝15.06,P<0.01);预培养1 d的阳性检出率为65%(51/78),显著高于未预培养结果的40%(31/78,χ2＝18.05,P<0.01).临床标本检测结果表明,我们的试剂与进口试剂检测结果基本相同.结论噬菌体生物扩增法快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆菌的快速检测,但是测定条件的选择极为重要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翁心华	复旦大学附属华山医院传染科	185	1261	17.0	26.0
2	钟敏	重庆市肺科医院检验科	24	272	9.0	16.0
3	胡忠义	上海市肺科医院结核基础实验室	45	473	13.0	20.0
4	靳安佳	上海市肺科医院结核基础实验室	10	168	6.0	10.0
5	倪莲娣	上海市肺科医院结核基础实验室	3	75	2.0	3.0
6	李建农	安徽省肺科医院检验科	3	93	3.0	3.0
7	董惠贤	上海市肺科医院结核基础实验室	1	68	1.0	1.0