剪接导致截短的乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白可诱导肝细胞空泡化

• 作者: 徐晓 林建银 林旭 郑大利 陈凌 黄清玲
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 RNA剪接 基因突变 表面抗原 转染
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 279-283
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 3721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.04.010

摘要

目的研究458～1308nt乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体截短的表面抗原大蛋白(large surface antigen, LS)的肝细胞致病性.方法将458～1308nt剪接变异体HBV DNA(基因号为AY238972,长度为2366bp)及全长HBV DNA(基因号AY206390,长度3215bp)中PreS2及S起始密码由ATG定点突变为ACG.以突变后的剪接变异体DNA为模板,PCR扩增剪接产生的截短 LS编码基因(LS-splice)及LS氨基端276个氨基酸的编码基因(LS276);以突变后的全长HBV DNA 为模板,PCR扩增全长LS编码基因.将上述DNA片段克隆至pCDNA3.1/Hyg(-)真核表达载体.重组载体以脂质体转染HepG2及Chang肝细胞,以HE染色观察细胞的空泡病变,并以流式细胞仪检测转染细胞的凋亡率.结果表达LS、LS-splice 、LS276的重组载体转染后均可引起HepG2及Chang肝细胞发生空泡样病变.此外,LS可引起HepG2及Chang肝细胞凋亡,而LS276、LS-splice致肝细胞凋亡作用消失.结论 458～1308nt HBV基因组剪接变异体产生的截短 LS可致肝细胞病变,其作用与其氨基端276个氨基酸有关.该类型HBV基因组剪接变异体在乙型肝炎发生发展中可能具有一定作用.