酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白相互作用的肝细胞蛋白

• 作者: 刘玲玲 吴云丽 林万松 林旭 焦伯延 陈婉南
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 表面抗原中蛋白 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 907-911
• 分类号: R373.21
• 字数: 4084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.10.005

摘要

目的 筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)相互作用的肝细胞蛋白.方法 PCR扩增MHBs编码基因并将S区起始密码子突变,获得目的 基因MHBs-mut,克隆于诱饵载体pGBKT7.在证实MHBs-mut蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛查与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白,并在酵母细胞内验证蛋白的相互作用.结果 构建酵母双杂交诱饵载体,获得重组质粒pGBKT7- MHBs-mut.Western blot显示其在酵母中表达MHBs-mut蛋白.酵母双杂交筛选并验证,得到与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白:COP9信号体第五个亚单位(COPS5,又名C- Jun结合蛋白 1,c-Jun-activation-domain binding protein 1, JAB1).结论 乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白与COPS5在酵母AH109细胞中具有相互作用.