用酵母双杂交体系筛选与FMRP相作用蛋白的cDNA

• 作者: Anne Sittler Barbara Bardoni Jean Louis Mandel 余珉 吴冠芸 沈岩 陈雨亭
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 脆性X智力低下蛋白 酵母双杂交体系 蛋白相互作用 泛素转运 酶9
• 年，卷（期）: 1998,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 173-178
• 页数: 6页
• 分类号: Q71|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的采用酵母双杂交体系寻找与脆性X智力低下蛋白(Fragile X men-tal retadation protein,FMRP)相互作用的蛋白,探讨FMRP的生物医学功能.方法以编码FMRPPro327-Thr518肽段的cDNA序列与pBTM116质粒DNA结合结构域重组作为"钓饵”,从小鼠胚胎cDNA文库中筛选与之相互作用蛋白的cDNA.结果筛选出13个与FMRPPro327-Thr518肽段特异性地相互作用的克隆,其中12个为小鼠泛素转运酶9(UBC9),1个是在GenBank中无高同源序列的未知cDNA序列.结论小鼠UBC9与人UBC9的氨基酸序列完全相同,且FMRP与UBC9蛋白表达的时空特征相似,因此认为人UBC9是与FMRP相互作用的蛋白,其相互作用的生物学意义有待进一步研究.本工作表明酵母双杂交体系是研究蛋白质相互作用的有效方法.