丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定

• 作者: 刘敏 刘锦锋 张伟 张树林 蔺淑梅 赵良 赵英仁 陈天艳
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 丙型肝炎病毒核心蛋白 酵母双杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-22,45
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2006.01.005

摘要

目的用含丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白的cDNA片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定.方法PCR扩增含HCV core蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中.扩增人胎肝cDNA文库并纯化、鉴定.结果获得含HCVcore蛋白的cDNA片段,并成功克隆入pGBKT7中.待转化的人肝cDNA文库滴度在5×108左右,纯化后的质粒DNA质量浓度约1 g/L.用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切显示插入片段大小不一.结论成功构建了核心蛋白的酵母双杂交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA文库的多样性很好,适合于筛选.为用酵母双杂交技术研究与HCV core蛋白相互作用的蛋白打下坚实基础.