应用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白

• 作者: 张艳 杨君 王省芬 王雪娟 阎媛媛 马峙英
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 黄萎病 海岛棉 酵母双杂交 互作蛋白 筛选
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 1-6,31
• 页数: 7页
• 分类号: S512.1+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2018.0092

摘要

前期研究表明海岛棉(Gossypium barbadense)GbVWR(Verticillium wilt resistance)基因参与了棉花抗黄萎病反应,但其抗病机制尚不清楚.本试验利用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白,并通过对互作关系的分析初步探讨其介导的棉花抗病机制.结果表明:本研究成功构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-GbVWR,并利用PEG/LiAc法将其转化至酵母菌株Y2HGold感受态细胞中,结果显示重组质粒无自激活活性及毒性;用携带诱饵载体pGBKT7-GbVWR的酵母菌株与黄萎病诱导的海岛棉Pima90-53酵母双杂交cDNA文库进行杂交,通过PCR、测序和数据库比对分析插入的基因片段,共筛选到24个与GbVWR潜在互作的蛋白,为进一步探明GbVWR的抗病功能提供了理论依据.