应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子REF的互作蛋白

• 作者: 代龙军 曾日中 李先昆 段翠芳 聂智毅 黎瑜
• 来源期刊: 热带亚热带植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 橡胶树 橡胶延长因子REF 橡胶生物合成 酵母双杂交系统
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 植物生理与分子生物学
• 页码范围: 400-406
• 分类号: Q943.2
• 字数: 5673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3395.2011.05.002

摘要

利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Hevea brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(ORF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD-GAL4-REF,并筛选以pAD-GAL4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功能分析.通过酵母双杂交筛选,共获得5种可能与REF互作的候选蛋白质,它们分别为与诱饵蛋白REF高度同源的REF家族成员、小橡胶粒子蛋白(SRPP)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)、激发子响应蛋白和泛素耦联酶E2,这表明橡胶延长因子REF除了与自身高度同源蛋白质可能存在相互作用之外,还可能与TCTP和激发子响应蛋白等其它蛋白质发生相互作用.这些结果有助于揭示橡胶粒子的生物学功能.