应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因

• 作者: 张斌 张黎颖 成军 李越 樊万虎 洪源 王琦 粱赟磊 袁菊 邢卉春
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 HBEBP2 双杂交系统技术 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 慢性病毒性肝炎发病机制的研究
• 页码范围: 793-795
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 字数: 2388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.07.004

摘要

目的 构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2(HBEBP2)的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因.方法 通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达.随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行双重筛选获得阳性克隆.提取文库质粒pACT2-DNA并与pGBKT7-HBEBP2共同转化AH109酵母菌株,于铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Tm/-Leu/-His/-Ade)上进行筛选以排除假阳性克隆.挑取真阳性克隆送测序,并进行生物信息学分析.结果 筛选出6种与HBEBP2相互作用的蛋白,其中包括人类线粒体蛋白、人类α-2-糖蛋白1、人类磷酸甘露糖-p-长醇利用缺陷1和人类丝氨酸蛋白酶抑制剂等4个已知功能蛋白及2个未知功能序列.结论 筛出人肝细胞中一组与HBEBP2相互作用的蛋白,为进一步探讨HBEBP2在HBV致病过程中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张斌	山西医科大学附属第一医院感染病科	26	70	5.0	6.0
2	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
3	张黎颖	北京地坛医院传染病研究所	34	100	5.0	8.0
4	洪源	北京地坛医院传染病研究所	44	70	5.0	6.0
5	李越	北京地坛医院传染病研究所	7	8	2.0	2.0
6	王琦	北京地坛医院传染病研究所	29	36	3.0	4.0
7	樊万虎	北京地坛医院传染病研究所	2	2	1.0	1.0
8	袁菊	北京地坛医院传染病研究所	7	3	1.0	1.0
9	邢卉春	北京地坛医院传染病研究所肝病四科	16	98	6.0	9.0
10	粱赟磊	山西医科大学附属第一医院感染病科	1	1	1.0	1.0