应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白

• 作者: 刘妍 张忠东 成军 杨艳杰 王建军 钟彦伟 陈东风
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示技术 肝炎病毒,乙型 抗原,表面 启动区(遗传学) 筛选
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: R512.6+3
• 字数: 3865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.01.009

摘要

目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体展示技术,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析.结果噬菌体经富集后,从随机筛选的20个克隆中得到4个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性分析,确定了和HBV SPⅡ结合的肝细胞蛋白--尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶4(NADHDH4).结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了HBV SPⅡ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因,为进一步研究HBV的复制、转录、调节机制开辟了新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	117	1347	20.0	31.0
2	刘妍	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	62	535	12.0	21.0
3	钟彦伟	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	33	327	9.0	17.0
4	王建军	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	22	57	3.0	7.0
5	张忠东	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	1	9	1.0	1.0