应用特异性噬菌体抗体克隆和筛选新的大肠癌抗原基因

• 作者: 李官成 李艳雯
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 大肠癌 cDNA文库 抗原 噬菌体人抗体 基因克隆
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 113-116
• 页数: 4页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2006.02.003

摘要

目的构建人大肠癌细胞cDNA表达文库,用抗人大肠癌噬菌体抗体CH209筛选新的大肠癌抗原基因.方法抽提人大肠癌细胞HRT-18的总RNA后分离mRNA,利用SMART(Switching Mechanism at 5th end of RNA Transcript)技术合成cDNA,与λTripIEx2载体连接包装成cDNA文库.测定原始文库的滴度和文库重组率,鉴定插入片段的大小,测定扩增文库库容量并鉴定CH209筛选的阳性克隆.结果原始文库滴度为6.5×106pfu/mL,重组率为97%;插入片段的大小介于0.5-2.0kb之间;扩增文库滴度为1.1×109pfu/mL,筛选后获得10个阳性克隆,代表10个抗原基因,其中5个与已知基因高度同源,3个与已知基因部分同源,2个是新基因.结论成功构建了人大肠癌细胞的cDNA文库;用CH209筛选得到10个大肠癌相关抗原基因,有2个是新基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李官成	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所	65	245	9.0	11.0
2	李艳雯		14	37	4.0	5.0