应用重组腺病毒载体制备人CTLA4Ig融合蛋白

• 作者: 吴军 周立新 张宁 张小蓉 易绍萱 杨世新 罗高兴 贺伟峰 陈希炜
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 人CTLA4Ig 腺病毒载体 同源重组
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1488-1489,1491
• 页数: 3页
• 分类号: Q813.2
• 字数: 2626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2004.10.025

摘要

目的在实验室水平制备并鉴定人CTLA4Ig融合蛋白.方法将人CTLA4Ig cDNA片段构入重组腺病毒载体中,用该表达载体感染293细胞并在其中表达人CTLA4Ig,再应用SPA亲合层析柱自细胞培养上清中纯化出该融合蛋白,以WESTERN印迹验证后,观察了所制备CTLA4Ig对混合淋巴细胞反应的影响.结果经亲合层析柱洗下的蛋白为分子量为53.0kd的单一组分,经WESTERN印迹证实为CTLA4Ig,并发现所制备CTLA4Ig能呈剂量依赖性抑制混合淋巴细胞反应.结论本法成功制备了具有生物学活性的重组人CTLA4Ig融合蛋白.