phP53-luc质粒的构建及其用于检测化学物质遗传毒性的初步分析

• 作者: 吴丹 孙树汉 施柯 李雅慧 黎怀星
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: p53基因启动子 荧光素酶 遗传毒性
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 277-279
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2004.03.014

摘要

目的:构建2个分别由p53基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒,并探讨其用于检测遗传毒性化学物质的可行性.方法:通过PCR扩增人p53基因启动子片段,然后采用重组DNA技术克隆入pGL3-BASIC的荧光素酶报告基因的上游而获得phP53-luc表达质粒.用脂质体转染法将phP53-luc转染入NIH 3T3细胞并分别用5-氟尿嘧啶(5-FU)处理,最后裂解细胞用Dual-Luciferase Reporter Assay System检测荧光素酶报告基因表达.结果:构建了2个分别由p53基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒,位于这2个质粒上的荧光素酶报告基因在NIH 3T3细胞内的表达显著地受遗传毒性化学物质的诱导,其表达比对照的pGL3-BASIC载体上的荧光素酶报告基因高近240倍.结论:基于人p53基因启动子的荧光素酶报告基因分析系统可以用于快速检测环境毒物的遗传毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙树汉	第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	158	1064	16.0	23.0
2	吴丹	第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	12	159	5.0	12.0
3	黎怀星	第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	11	9	2.0	2.0
4	李雅慧	第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	5	39	4.0	5.0
5	施柯	第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	10	26	3.0	4.0