人角质形成细胞体外扩增与生物学特征变化

• 作者: 刘伟 崔磊 曹谊林 杨光辉 杨军 邓辰亮
• 来源期刊: 上海第二医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 角质形成细胞 扩增 组织工程
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 皮肤组织工程
• 页码范围: 299-301,318
• 页数: 4页
• 分类号: Q813|Q27|R322.99
• 字数: 2229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2004.04.019

摘要

目的研究人角质形成细胞体外扩增过程中生物学特征的变化,观察其角蛋白19(K19)mRNA表达及克隆形成率与扩增受限的关系.方法取2～3岁健康儿童包皮20例,通过2.4 U/mL dispase和0.05%胰酶(tripsin)分离,获得角质形成细胞体外培养.细胞计数仪计数描绘生长曲线.光镜观察细胞体外扩增过程中形态学改变,同时计数克隆形成率.RT-PCR检测角质形成细胞K19和Involucrin的mRNA表达情况.结果儿童包皮角质形成细胞体外平均最大扩增能力为(700±37)倍.细胞平均获得率为(1.64±0.297)×106/cm2包皮.角质形成细胞原代(P0)、第2代(P2)、第4代(P4)、第5代(P5)克隆形成率分别为:(45±4)%,(37±4)%,(28±3)%,(9±2)%,第6代(P6)克隆形成率消失.RT-PCR检测发现P0、P2、P4、P5有K19 mRNA 表达,P6未见表达;Involucrin各代均可见表达.结论人角质形成细胞体外扩增能力随传代逐渐降低,扩增受限与角质形成细胞中K19 mRNA表达及克隆形成率消失相关.