Cyclin D3正、反义表达质粒在淋巴瘤细胞系Raji中的转染与鉴定

• 作者: 严美娟 王夏强 程纯 邵晓轶
• 来源期刊: 中国交通医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: cyclin D3 表达质粒 转染 淋巴瘤 细胞周期
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著与基础研究
• 页码范围: 630-633
• 页数: 4页
• 分类号: Q253
• 字数: 4265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2440.2004.06.003

摘要

目的:构建人类cyclinD3正义和反义真核表达质粒,分别转染到淋巴瘤细胞系Raji细胞中,为探讨cyclinD3基因对淋巴瘤细胞生物学行为的影响提供研究基础.方法:以Raji细胞总RNA为模板,通过RT-PCR获取cyclinD3全长cDNA,克隆入pGEM-T载体,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构成含cyclin D3的表达质粒pcDNA3-cyclinD3.再运用DNA重组技术将cyclin D3基因反向克隆到pcDNA3.1中,构建成cyclin D3反义表达质粒pcDNA3-ascyclin D3.用脂质体介导的基因转染方法,将cyclin D3正、反义表达质粒和空质粒分别导入Raji细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株,用WesternBlot方法鉴定cyclinD3基因的表达.结果:酶切鉴定和测序分析证实,实验成功构建了cyclin D3正、反义表达质粒.与转染cyclin D3正义表达质粒和空质粒的细胞相比,转染cyclin D3反义表达质粒的Raji细胞中cyclin D3表达水平下降.结论:正、反义cyclin D3在淋巴瘤细胞中的转染和表达,为进一步研究cyclin D3在淋巴瘤细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严美娟	南通大学微生物与免疫学教研室	33	47	4.0	5.0
2	程纯	南通大学微生物与免疫学教研室	65	226	9.0	12.0
3	邵晓轶	南通大学微生物与免疫学教研室	31	91	6.0	8.0
4	王夏强	南通大学微生物与免疫学教研室	13	38	4.0	5.0