淤胆血清"病理微环境"诱导胚胎干细胞向肝细胞分化

• 作者: 方天翎 曹铭辉 杨勇志 邓小耿 邵静 闵军 陈积圣 魏菁
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 肝细胞 淤胆血清
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 985-989
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.06.016

摘要

目的:探讨淤胆血清"病理微环境"培养体系诱导胚胎干细胞(ESC)向肝细胞分化的可行性.方法:将小鼠ESC细胞系E14在无白血病抑制因子培养基中培养,使其自发分化为拟胚体,加入FGF-4和HGF初步诱导,然后置于5%淤胆鼠血清"病理微环境"筛选培养液中继续培养2周,然后进行细胞形态学观察,白蛋白和CK8/18免疫组化染色,白蛋白与转甲状腺蛋白RT-PCR检测,细胞糖原染色及尿素合成功能分析.结果:经初步诱导分化的ESC置于5%淤胆血清"病理微环境"筛选培养液中培养,初期细胞生长受抑制,2周后分化为肝细胞样细胞,细胞呈现良好的均质性;免疫组化染色显示白蛋白和CK8/18表达;RT-PCR显示有白蛋白、转甲状腺蛋白等的mRNA转录;细胞有糖原和尿素合成功能.结论:采用含淤胆血清的病理微环境培养体系从经FGF-4和HGF初步诱导的胚胎干细胞中有效筛选出了具有功能的肝细胞,细胞有较好的均质性,为临床肝细胞替代治疗、获取丰富供体细胞来源提供了新思路.