应用淤胆血清"病理微环境"从ESC中筛选肝干细胞的研究

• 作者: 伍耀豪 周嘉嘉 张杰 李治熹 谢平 邓小耿 邱荣林
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 肝细胞移植 诱导分化 淤胆血清
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 558-561
• 分类号: R5
• 字数: 3163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2011.04.003

摘要

目的:探讨淤胆血清"病理微环境" 培养体系诱导胚胎干细胞(ESC)向肝细胞分化的效果及对肝干细胞的筛选作用.方法:将小鼠ESC细胞系E14在无白血病抑制因子培养基中培养,使其自发分化为拟胚体,加入FGF-4和HGF初步诱导,然后置于5%淤胆鼠血清"病理微环境"筛选培养液中继续培养2周,然后进行细胞形态学观察,ALB和CK8/18免疫荧光染色,电镜检查和吲哚氰绿(ICG)摄取试验.结果:经初步诱导分化的ESC置于5%淤胆血清"病理微环境"筛选培养液中培养,初期细胞生长受抑制,部分细胞坏死、凋亡并脱落.1周左右可见上皮样细胞集落呈优势生长.2周左右可见较多肝细胞样集落形成单位(H-CFU),大部分细胞分化为多角形的肝细胞样细胞,呈现较好的均质性,从中央到周边呈逐渐分化成熟的趋势;免疫荧光染色显示ALB和CK8/18表达;电镜检查可见与肝细胞相似的超微结构;吲哚氰绿(ICG)摄取试验可见大量ICG阳性细胞,提示这些细胞具备部分肝细胞特性,且筛选诱导组ICG阳性率显著高于对照组(P ＜ 0.05).结论:采用含淤胆血清的"病理微环境"培养体系从经FGF-4和HGF初步诱导的胚胎干细胞中有效筛选出了具有功能的肝细胞样细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周嘉嘉	中山大学附属第二医院小儿外科	40	203	6.0	13.0
2	邓小耿	中山大学附属第二医院小儿外科	23	67	5.0	6.0
3	张杰	中山大学附属第二医院小儿外科	36	102	6.0	8.0
4	伍耀豪	中山大学附属第二医院小儿外科	13	31	4.0	5.0
5	邱荣林	中山大学附属第二医院小儿外科	7	15	3.0	3.0
6	谢平	中山大学附属第二医院小儿外科	5	101	4.0	5.0
7	李治熹	中山大学附属第二医院小儿外科	2	4	1.0	2.0