帕金森病基因治疗的理论:VMAT2基因的表达及其对MN9D细胞多巴胺代谢的影响

• 作者: 余爽 张京钟 徐群渊 段春礼 赵春礼
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 帕金森病 多巴胺 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 667-669
• 页数: 4页
• 分类号: R742
• 字数: 5898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.04.035

摘要

目的:获得人Ⅱ型囊泡单胺转运体(vesicular monoamine transporter-2,VMAT2)基因,转染至MN9D细胞,通过检测细胞内外单胺类递质含量的变化评价VMAT2基因促进单胺类递质循环利用的效应.方法:从人胎脑中提取总RNA,RT-PCR方法扩增目的cDNA片段并将其重组于pGEM-Easy-T载体中,进行全序列测定.重组真核表达载体pBK-RSV-VMAT2,转染MN9D细胞,免疫细胞化学检测VMAT2的表达,HPLC检测细胞内外单胺类递质含量的变化.结果:RT-PCR扩增到1 637 bp的带有Kozak序列的cDNA片段.原位杂交证实pAAV-VMAT2能在COS7细胞表达;免疫组化证实转基因的MN9D细胞(实验组)vMAT2免疫着色明显高于对照组.HPLC结果表明实验组中细胞内外的多巴胺含量分别升高至(227.2±20.8)%和(302.6±15.7)%(P＜0.01),而细胞外HVA、DOPAC分别降低至(48.1±5.3)%和(55.7±4.9)%(P＜0.05),细胞内HVA,DOPAC分别升高至(332.1±28.2)%和(1 176.8±82.5)%(P＜0.01).结论:克隆了VMAT2cDNA片断,可在真核细胞中表达.该基因的过表达可促进多巴胺的循环利用,有望用于帕金森病的基因治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐群渊	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	140	593	11.0	17.0
2	赵春礼	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	45	182	8.0	11.0
3	段春礼	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	14	193	5.0	13.0
4	张京钟	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	9	78	3.0	8.0
5	余爽	首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复重点实验室	6	30	2.0	5.0