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摘要:
目的:应用基因芯片技术,检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式激活基因1(NS3TP1)的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步NS3TPl蛋白可能的分子生物学功能.方法:设计并合成NS3TPl基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS3TP1蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术构建表达载体pcDNA3.1(-)-NS3TPl.以脂质体技术转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取总mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行DNA芯片分析并比较.结果:构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误,提取高质量的总mRNA并进行逆转录成为cDNA,进行DNA芯片技术分析.在1152个基因表达谱的筛选中,发现有26个基因表达水平显著上调,14个基因表达水平显著下调.结论:应用基因表达谱芯片技术成功筛选了NS3TPl转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明NS3TPl蛋白可能的生物学功能及HCV的致病机制提供理论依据.
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文献信息
篇名 应用基因表达谱芯片技术筛选NS3TP1转染细胞差异表达基因
来源期刊 世界华人消化杂志 学科 生物学
关键词
年,卷(期) 2004,(7) 所属期刊栏目 研究快报
研究方向 页码范围 1707-1711
页数 5页 分类号 Q7
字数 6244字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.07.047
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘妍 中国人民解放军第302医院传染病研究所 46 245 8.0 15.0
2 成军 中国人民解放军第302医院传染病研究所 83 902 16.0 28.0
3 王建军 中国人民解放军第302医院传染病研究所 51 331 11.0 17.0
4 纪冬 中国人民解放军第302医院传染病研究所 9 90 3.0 9.0
5 郭江 中国人民解放军第302医院传染病研究所 6 3 1.0 1.0
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22-117
1993
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