脂质体介导NF-кB decoy ODN低温缺氧对ECV-304的转染及复氧后对下游粘附分子及趋化因子基因表达的影响

• 作者: 丰贵文 于立新 张宏涛 赵显国
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ECV-304 低温缺氧保存/复氧 Liposone/decoy ODN 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 84-87,91
• 页数: 5页
• 分类号: R364.4|R692.11
• 字数: 3034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2004.11.021

摘要

目的探讨在Euro-Collin's(ECs)中,低温(4℃)缺氧条件下脂质体(in v1vo Liposome)介导N F-κ B诱捕物寡核苷酸(NF-κ B decoy ODN)对人脐静脉内皮细胞株(ECV-304)的转染效率以及复氧后对其细胞分子表达的影响.方法ECV-304在10%FBS的RPMI 1640培养液,37℃、5%CO2条件下培养,生长至单层融合后进行试验.使用前配制Liposome/decoy ODN和scrambled ODN复合物,Liposome与ODN的+/-电荷比率为2.应用荧光显微镜和流式细胞仪,观察在4℃条件下,ODN浓度1.0μM的ECs缺氧保存6h后ECV-304的平均荧光强度(MFI)和摄取率以及ODN的胞内分布;同时设立裸ODN转染为对照,观察Liposome介导ODN对ECV-304的转染效率.利用RT-PCR方法检测各组ECV-304的ICAM-1、VCAM-1、IL-8、MCP-1以及P-selectin的mRNA表达.结果在ECs中、4℃缺氧保存ECV-304 6h后,LiPosome介导ODN对ECV-304转染的MFI为10172.71±33.14,是裸ODN转染的91.1倍,细胞对ODN的摄取率为93.06±2.60%,是裸ODN转染的71 5倍.Liposome介导ODN转染的ECV-304,荧光显微镜下可见部分荧光颗粒分布于胞浆,胞核内可见强荧光颗粒;而裸ODN转染的ECV-304,胞浆内偶见少量荧光,胞核内未见荧光颗粒RT-PCR检测显示Liposome/decoy ODN转染ECV-304后,其ICAM-1,VCAM-1,IL-8,MCP-1以及P-selectin的mRNA的表达低于未转染组和Scramb.ODN转染组,有显著性差异.结论低温缺氧条件下和ECs中,Liposome能有效地将ODN转染到ECV-304的胞核中,而裸ODN则不能进入细胞;经Liposome/decoy ODN处理的ECV-3 04,其下游粘附分子及趋化因子的基因表达被抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于立新	第一军医大学南方医院肾移植科	75	298	9.0	12.0
2	丰贵文	第一军医大学南方医院肾移植科	4	2	1.0	1.0
3	张宏涛	郑州大学第一附属医院器官移植血液净化中心	26	137	5.0	11.0
4	赵显国	郑州大学第一附属医院器官移植血液净化中心	33	145	6.0	11.0