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摘要:
背景与目的:肝细胞癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,p53又是重要的抑癌基因,而RNA干扰(RNA interference,RNAi)不仅是一种经济、快捷、高效的抑制基因表达的技术手段,而且有可能在肿瘤基因治疗方面提供新的途径.因此,我们将外源性p53双链小RNA(small double stranded RNA,dsRNA)瞬时转染肝癌SK-Hep-1细胞系,观察其对肝癌细胞P53和P21蛋白表达及细胞周期的影响.方法:合成的p53 dsRNA和EGFP dsRNA,分别以200 ng和400ng的p53 dsRNA用脂质体转染法转染SK-Hep-1细胞,同时设0.9%NaCl空白对照和EG-FP及EGFP+EGFP dsRNA阳性对照组,每组3个复孔,分别在转染24h和48h时用流式细胞仪进行细胞周期检测,对转染p53 dsRNA 48h后应用Western Blot检测P53和P21蛋白的表达,初步探讨p53的dsRNA干扰对肝癌细胞影响的机制.结果:SK-Hep-1细胞在转染200ng p53dsRNA后G0-G1期细胞明显减少,24h时与空白对照相比减少了52.53%,与转染同剂量EG-FP+EGFPdsRNA的阳性对照组相比也减少了50.29%(P<0.05);S期细胞明显增多,24h时与空白对照相比增加了146.8%,与转染同剂量EGFP+EGFP dsRNA的阳性对照组相比增加了128.62%(P<0.05);G2-M期细胞也明显增多,24h时与空白对照相比增加了30.56%(P<0.05),与转染同剂量EGFP+EGFP dsRNA的阳性对照组相比增加了21.63%(P>0.05).转染400ng p53 dsRNA的SK-Hep-1细胞周期变化也基本相同.转染200ng和400ng p53 dsRNA的SK-Hep-1细胞在48h时,没有检测到P53蛋白的表达,而部分抑制P21蛋白的表达.结论:p53 dsRNA可明显抑制SK-Hep-1细胞P53和部分抑制P21蛋白的表达,并明显促进SK-Hep-1细胞的增殖,其促进细胞增殖作用可能与其抑制细胞P53和部分抑制P21蛋白的表达有关.
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文献信息
篇名 RNA干扰p53对肝细胞癌SK-Hep-1细胞细胞周期的影响
来源期刊 中国体视学与图像分析 学科 医学
关键词 肝肿瘤 p53 p21 dsRNA RNAi SK-Hep-1
年,卷(期) 2005,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 6-12
页数 7页 分类号 R730.1
字数 4667字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1007-1482.2005.01.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱明华 第二军医大学长海医院病理科 175 988 15.0 23.0
2 刘晓红 第二军医大学长海医院病理科 67 510 10.0 20.0
3 陈颖 第二军医大学长海医院病理科 50 320 9.0 16.0
4 祝峙 第二军医大学长海医院病理科 32 269 8.0 15.0
5 冯菲 第二军医大学长海医院病理科 22 105 7.0 9.0
6 曹晓哲 第二军医大学长海医院病理科 5 59 4.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
肝肿瘤
p53
p21
dsRNA
RNAi
SK-Hep-1
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国体视学与图像分析
季刊
1007-1482
11-3739/R
16开
北京清华大学工物系(刘卿楼)211室
1996
chi
出版文献量(篇)
1334
总下载数(次)
3
总被引数(次)
7461
相关基金
中国博士后科学基金
英文译名:China Postdoctoral Science Foundation
官方网址:http://www.chinapostdoctor.org.cn/index.asp
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导