应用绿色荧光研究人抑瘤素基因在CHO细胞中的表达

• 作者: 尉承泽 李晓利 王强 许红民 赵士富 赵彦林
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抑瘤素 荧光 基因表达 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 404-406
• 页数: 3页
• 分类号: R338
• 字数: 1687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2005.06.002

摘要

目的:建立一种简易、快速检测细胞内外源性基因稳定表达的方法.方法:以携带绿色荧光蛋白的真核表达质粒pEGFP-N1为骨架,将完整的 hOSM基因ORF克隆到pEGFP-N1上游的多克隆位点,构建表达载体pOSM-EGFP-N1,脂质体介导转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),G418筛选,挑选阳性克隆.荧光显微镜、流式细胞术分析转染了pOSM-EGFP-N1质粒的CHO细胞纯度.RT-PCR的方法分析OSM基因水平表达.结果:成功建立稳定表达OSM的CHO细胞株(CHO-OSM-EGFP),纯度达到99.76%,且OSM基因在CHO-OSM-EGFP细胞中稳定表达.结论:构建了携带绿色荧光、表达OSM的pOSM-EGFP-N1质粒转染的CHO细胞,只通过荧光显微镜观察和FCM检测细胞绿色荧光,即可明确OSM转染成功.为表达外源性基因阳性细胞的筛选提供了简易的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王强		24	114	7.0	9.0
2	赵士富	军事医学科学院二所十室	9	49	3.0	7.0
3	赵彦林	军事医学科学院二所十室	3	13	2.0	3.0
4	尉承泽		1	1	1.0	1.0