猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫细胞中的表达及其特性

• 作者: 佟铁铸 吕建强 樊惠英 琚春梅 陈焕春 黄红亮
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 ORF2蛋白 昆虫细胞表达 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 975-978
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.021

摘要

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将圆环病毒2型的ORF2全基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTMI中,获得重组转移载体pFast-OFR2,再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白菌落筛选得到含ORF2基因的重组穿梭载体Bac.ORF2,以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染sf9细胞,获得重组病毒,命名为Ac.ORF2.间接免疫荧光分析表明,PCV2阳性血清能使Ac.ORF2感染的sf9昆虫细胞呈强的荧光着色;SDS-PAGE与Western-blotting分析可见大小约为28kD的特异性带,表明Ac.ORF2在sf9细胞中成功表达了PCV2 ORF2蛋白.将该表达蛋白纯化并经磷钨酸负染后,通过电镜观察可见形态与PCV2病毒粒子相似的病毒样颗粒(VLPs),其中某些颗粒由于中心浓染而似空衣壳,其直径也为17nm左右.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	黄红亮	华中农业大学动物医学院动物病毒室	10	117	7.0	10.0
3	琚春梅	华中农业大学动物医学院动物病毒室	12	252	9.0	12.0
4	吕建强	华中农业大学动物医学院动物病毒室	14	420	12.0	14.0
5	樊惠英	华中农业大学动物医学院动物病毒室	4	63	3.0	4.0
6	佟铁铸	华中农业大学动物医学院动物病毒室	3	32	2.0	3.0