谷胱甘肽-S-转移酶-人表皮生长因子融合蛋白基因的表达及其产物的生物活性

• 作者: 孙曼霁 智庆文 李仕贵 李前 王淑豪 王玉霞
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白质类 谷胱甘肽转移酶 生长物质 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 113-117
• 页数: 5页
• 分类号: R963
• 字数: 3491字
• 语种: 英文

摘要

目的通过融合蛋白的表达使人表皮生长因子(hEGF)易于纯化.方法构建基于tac启动子的pGEX 4T-1-hEGF原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-1-硫代-β-D半乳糖苷诱导,表达谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-hEGF融合蛋白.结果表达产物占细菌总蛋白的34%.部分为可溶性的,部分形成包涵体.菌体裂解上清液经Glutathione Sepharose 4B纯化后,SDS-PAGE电泳出现一条32 ku蛋白条带,与GST-hEGF融合蛋白的计算分子量相符.菌体裂解液中的可溶性GST-hEGF的产率为63 mg·L-1.将其添加到培养的HEK-293细胞中,能明显促进该细胞的分裂和生长.结论成功地构建并表达了GST-hEGF融合蛋白基因,其表达产物GST-hEGF显示良好的促细胞增殖活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙曼霁	军事医学科学院毒物药物研究所	66	374	8.0	17.0
2	王玉霞	军事医学科学院毒物药物研究所	37	168	8.0	11.0
3	李前	军事医学科学院毒物药物研究所	22	120	5.0	10.0
4	智庆文	山东省科学院生物研究所	2	13	2.0	2.0
5	王淑豪	军事医学科学院毒物药物研究所	5	10	2.0	3.0