CK20单克隆抗体研制及鉴定

• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗CK20单克隆抗体 SPA-Sepharose 杂交瘤技术 Western blot ELISA
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 781-783,785
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3171字
• 语种: 中文

摘要

目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,最后用双向琼脂扩散法、Western blot和间接ELISA法鉴定抗体的特异性、Ig亚型和效价.结果:获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,染色体众数为101(99～103),其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1:106,属IgG1亚型.结论:成功获得了CK20单克隆抗体,命名为L20031030,其特异性强,效价高.