稳定表达HBV C蛋白羧基端siRNA抑制HBV cccDNA的实验研究

• 作者: 刘莉 唐世刚 杨兵厂
• 来源期刊: 中国感染控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 短小干扰RNA 超螺旋双链闭环DNA
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-201
• 页数: 4页
• 分类号: R512.6+2
• 字数: 2681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9638.2005.03.002

摘要

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)C蛋白羧基端短小的干扰RNA(siRNA)对HBV超螺旋双链闭环DNA(cccDNA)水平的影响.方法设计合成1对能稳定表达针对HBV C基因羧基端(2389nt-2410nt)序列的22-mer siRNA寡核苷酸,其两端带有限制性酶切位点,表达后可形成发夹结构,退火后形成双链;然后将这一双链寡核苷酸与重组腺相关病毒载体(rAAV)连接,构建重组体rAAV-siRNA.将重组体rAAV-siRNA加入培养增殖良好的22.1.5细胞中孵育,72 h后用实时聚合酶链反应(Real timePCR)法检测经处理过的22.1.5细胞和培养上清中HBV cccDNA的表达水平和HBV DNA的复制水平.结果重组体rAAV-siRNA实验组HBV cccDNA水平较空白对照组显著降低(P＜0.01),HBVDNA的复制水平在实验组亦明显下降;在无关序列对照组未发现对HBV cccDNA水平影响和HBV DNA复制的抑制作用.结论HBV羧基端siRNA能显著降低HBV cccDNA的水平和HBVDNA的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐世刚		10	38	3.0	6.0
2	刘莉		81	551	11.0	20.0
3	杨兵厂		11	14	2.0	3.0