丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a基因的克隆和表达

• 作者: 夏铮 徐小蓉 詹金彪
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 核糖体蛋白质类 核糖体失活蛋白luffin 丝瓜/化学 克隆,分子 基因表达 细胞毒性 HIV整合酶 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 207-211,216
• 页数: 6页
• 分类号: R996.2
• 字数: 3731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.03.003

摘要

目的:从丝瓜籽中克隆HIV整合酶抑制剂luffin-a基因,并构建其表达载体.方法:根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列.构建表达载体pET-44a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达.用透析法对包含体复性;SDS-PAGE鉴定luffin-a表达产物,用MTT法分析其生物学活性.结果:克隆的luffin-a基因与国外报道的核苷酸序列同源性为99.73%,其所编码的氨基酸序列完全一致.经SDS-PAGE分析:luffin-a主要存在于包含体中.MTT法测定:复性后蛋白具有与蓖麻毒素A链相似的细胞毒性.结论:本研究成功地构建了luffin-a的表达系统,所表达蛋白经复性后具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹金彪	浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室	45	200	8.0	12.0
2	夏铮	浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室	2	252	1.0	2.0
3	徐小蓉	浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0