一种合成人血小板因子4基因的简便有效方法

• 作者: 吴思娴 吴晓萍 李校堃 苏志坚 许华 赵文 郑青
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血小板因子4 基因合成 基因表达利用纳米技术运送抗癌药的新给药方式
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 590-593
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2005.06.025

摘要

目的:用一种简便有效的方法合成hPF4基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达.方法:根据hPF4基因的序列,用touch-down PCR的方法合成hPF4基因,将合成的基因片断克隆到表达载体pCEX-4T-1中,构建了重组质粒pGEX-4T-1-hPF4,并将之转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达由谷胱甘肽转移酶和hPF4组成的融合蛋白.结果:用touch-down PCR的方法成功合成了hPF4基因.融合蛋白形成包含体,表达量约为全菌体蛋白的30%.结论:Touch-down PCR方法可作为合成其它目的基因的简便有效方法.BL21(DE3)/pGEX-4T-1表达系统能高效表达合成的hPF4基因,为下一步hPF4的纯化与生物学活性研究打下了基础.