狂犬病毒融合糖蛋白DNA疫苗及免疫效果的研究

• 作者: 于洪涛 代长海 周明岩 崔颖杰 李宇辉 王进 胡晓明 袁彦宝 谷丽萍 郭岩
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病病毒 糖蛋白 DNA疫苗 细胞免疫 体液免疫
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 856-859
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2904字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含两种狂犬病毒疫苗株的融合糖蛋白基因DNA疫苗并对小鼠的免疫效果进行评价.方法:用RT-PCR法分别扩增和分离出SRV9株和CTN株的狂犬病毒糖蛋白部分表位的基因(SRV9毒株的1～252氨基酸和CTN毒株253～524氨基酸),构建含融合G蛋白基因的DNA疫苗质粒VR1055-SRV9CTN.碱裂解法大量提取重组质粒并经Sepharose 4FF柱层析纯化后直接肌肉注射免疫NIH小鼠,用ELISA法和淋巴细胞转化实验分别检测质粒DNA疫苗诱导小鼠产生抗狂犬病毒的体液免疫和细胞免疫效果.CTLL-2依赖细胞株/MTT比色法进行IL-2活性测定.结果:VR1055-SRV9CTN DNA疫苗具有较好的诱生狂犬病毒抗体能力.诱导细胞免疫方面,质粒VR1055-SRV9CTN DNA疫苗和空载体对照组的ConA刺激指数存在显著性差异(t=7.201,P=0.000).小鼠血清中的IL-2活性测定表明DNA疫苗组显著高于空载体组(t=21.616,P=0.000).CVS株RV脑内攻击保护实验中,疫苗组和对照组小鼠存活率分别为63%、25%,二者间差异具有显著性(t=7.065,P=0.008).结论:含狂犬病毒糖蛋白基因VR1055-SRV9CTN DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,具有较好的免疫保护效果.