快速筛选芳香烃受体基因特异RNA干扰序列的初步研究

• 作者: 吕嘉春 宾晓农 李秀英 赖延东
• 来源期刊: 中国职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 芳香烃受体 siRNA表达盒 PCR
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: R135|R730.1
• 字数: 2666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6486.2005.06.002

摘要

目的筛选能诱导人芳香烃受体(AhR)基因表达沉默的特异RNA干扰片段. 方法根据RNA干扰设计的原则,选择4个片段,用聚合酶链反应(PCR)方法,以含有人U6启动子的质粒为模板,分别扩增正义和反义小干扰RNA(siRNA)表达盒,纯化后直接转染人支气管上皮细胞(16HBE),抽提细胞总RNA,定量竞争逆转录PCR(RT-PCR)检测目的基因的mRNA表达差异,确定RNA干扰的效率. 结果含AhR的干扰序列a493、a671、a1337和a1885的siRNA表达盒对AhR的mRNA表达抑制率分别为61.6%、-0.5%、78.6%和95.4%. 结论运用PCR扩增siRNA表达盒从多个候选序列中快速筛选出芳香烃受体有效的干扰序列,为进一步的基因功能研究创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕嘉春	广州医学院化学致癌研究所	112	1265	17.0	30.0
2	宾晓农	广州医学院化学致癌研究所	48	362	11.0	16.0
3	李秀英	暨南大学基因组药物研究所	29	50	5.0	5.0
4	赖延东	广州医学院化学致癌研究所	12	22	3.0	4.0