问号钩端螺旋体磷脂酶C的活性及其内化时细胞内游离Ca2+水平的变化

• 作者: 严杰 李淑萍 李立伟 毛亚飞 王焕萍 罗依惠
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体,问号/致病力 细胞黏附 胞吞作用 Vero细胞 J774A.1细胞 钙 磷脂酶C
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 15-20
• 页数: 6页
• 分类号: R377|R514.4
• 字数: 4556字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.01.004

摘要

目的:了解不同毒力的钩端螺旋体(简称钩体)对细胞内游离Ca2+水平的影响及其磷脂酶C(PLC)活性与细胞内游离Ca2+水平的关系.方法:建立问号钩体Vero和J774A.1细胞感染模型.采用fluo-3/AM胞内Ca2+特异荧光标记激光共聚焦技术,检测强毒力的问号钩体黄疸出血群赖型56601株和弱毒力的波摩那群波摩那型56608株及无毒力的双曲钩体Patoc Ⅰ株作用的Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+水平.以[3H]PIP2为底物,采用同位素法检测上述3株钩体培养物上清、胞浆和胞膜中PLC的活性.结果:正常Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+基础值分别为(102.3±8.2)%和(105.9±7.3)%,在观察时间内Patoc Ⅰ株钩体作用细胞的荧光强度变化百分数一直波动于(102.3±8.2)%～(102.2±8.3)%.问号钩体56601株感染的Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+浓度呈双峰型增高,第一峰荧光强度变化百分数分别为(430.5±35.7)%和(747.5±18.5)%,第二峰荧光强度变化百分数分别为(380.6±17.4)%和(804.6±22.4)%.问号钩体56608株感染Vero和J774A.1细胞,其胞内游离Ca2+浓度均呈缓慢的单一坡型升高,其最大荧光强度变化百分数分别为(235.0±19.3)%和(402.4±17.4)%,明显小于56601株问号钩体(P<0.01).问号钩体56601株和56608株及双曲钩体Patoc Ⅰ株的培养物上清、胞浆蛋白和胞膜蛋白成分中均显示PLC活性(P<0.05).结论:不同毒力的问号钩体所感染细胞的胞内游离Ca2+水平及其峰型有明显差异,而且与被感染细胞的种类有关,与PLC活性无关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学教研室	265	1149	14.0	20.0
2	毛亚飞	浙江大学医学院病原生物学教研室	41	232	9.0	12.0
3	李立伟	浙江大学医学院病原生物学教研室	34	277	7.0	15.0
4	李淑萍	浙江大学医学院病原生物学教研室	16	109	6.0	10.0
5	罗依惠	浙江大学医学院病原生物学教研室	14	68	6.0	7.0
6	王焕萍	浙江大学医学院病原生物学教研室	6	13	3.0	3.0