银鲫原肠胚差异表达基因的筛选

• 作者: 刘静霞 桂建芳 石耀华
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 银鲫 原肠胚 胚胎发育 SMART cDNA文库 差异表达
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 页码范围: 359-365
• 页数: 7页
• 分类号: Q173
• 字数: 3796字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2005.04.002

摘要

胚胎发育是基因组中各个基因在时间和空间上选择性表达的结果.为了鉴定参与鱼类早期胚胎发育和胚层分化的调控因了,分别构建了银鲫(Carassius auratus gibelio)原肠胚和成熟卵子的SMART cDNA文库,并采用差异筛选的方法,从银鲫原肠胚SMART cDNA文库中筛选不同于成熟卵子的差异表达基因.通过菌斑和PCR产物的两轮斑点杂交,从大约1500个克隆中筛选出131个阳性克隆,从中选择58个克隆测序并将测得的序列进行了数据库比对分析,结果显示这些差异表达基因大部分为参与转录和翻译的调控因子和核糖体蛋白以及一些在胚胎早期大量表达的参与脂类代谢的脂蛋白和一些未知的新基因.接着采用RT-PCR技术,对其中6个基因在胚胎发育不同阶段的表达特征进行了分析,进一步证实这些基因在胚胎发育过程中存在表达差异;研究还从分析的基因中揭示出4类不同的表达模式.通过本研究,已筛选出一批在银鲫胚胎发育早期开始表达的调控基因,为开展鱼类胚胎发育早期表达基因的功能研究奠定了前期工作基础.