GFP质控芯片的初步研究

• 作者: 吴清华 徐秋林 李凌 毛向明 石嵘 郑文岭 马文丽
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 寡核苷酸探针 基因芯片 绿色荧光蛋白 质量控制 限制性显示
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 4711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.04.007

摘要

目的:建立一种质量控制芯片来监测样品标记、杂交和检测过程中的失误.方法:针对GFP基因设计的4条60mer寡核苷酸探针和1条阳性对照探针poly(U)与流感寡核苷酸探针一起打印在DAKO玻片上,并构建了GFP基因的克隆载体和体外表达载体,将从这两种重组载体上获得的绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的RNA、DNA片段和人的全血样品中的DNA用限制性显示技术(Restriction Displaytechnology,RD)扩增标记,将标记的样品和荧光标记的通用引物U分别与芯片杂交、检测,并对扫描的结果进行统计分析.结果:GFP探针与相应的样品杂交时出现阳性信号,阳性对照探针在所有的杂交中均出现阳性信号,而空白对照则未检测荧光信号.结论:建立的质控芯片具有较好的敏感性和特异性,可以用于基因芯片中的质量监控.