人骨髓间充质干细胞的分离培养及其生物学特性的研究

• 作者: 丁伟荣 何丹 吴晓牧 易敬林 杨志刚 杨海军 柳喆 陈波
• 来源期刊: 江西医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨髓 间充质干细胞 细胞培养
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道:干细胞基础研究及应用
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 4390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2005.06.001

摘要

目的研究人骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养条件,并探讨其生物学特性.方法取无恶性血液病的32～65岁的成人骨髓7例,经密度梯度离心得到单个核细胞,加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液,将细胞的密度调整到1×106个/mL,接种到12孔培养板中(1 mL/孔)进行培养,48 h 后更换新鲜培养液,以后每3 d 换液1 次.当细胞铺满培养板底90%以上时,按常规方法进行细胞传代培养.用流式细胞术检测培养细胞的CD29、CD44、CD166、CD105、CD34、CD45、HLA-DR表达情况.并且使用脂肪细胞诱导培养液诱导培养MSCs,油红O染色检测其能否被诱导分化为脂肪细胞.结果成人骨髓接种后24 h内细胞开始聚集成细胞集落,并从集落中长出少许长梭形细胞,6～15 d细胞进入快速增殖期,一般培养20～25 d后细胞汇合成片铺满培养板底;而传代培养的细胞每代约需10～15 d即可铺满瓶底.流式细胞术检测结果显示,此次培养的骨髓来源细胞高表达CD29、CD44、CD166、CD105,不表达CD34、CD45、HLA-DR,符合骨髓MSCs细胞的特性.油红O染色显示MSCs可以被诱导分化为脂肪细胞.结论用密度为1.077 g/mL淋巴细胞分离液作为分离液,密度梯度离心法分离培养的人骨髓MSCs增殖力强,操作简单,是一种较好的分离和培养MSCs的方法.MSCs可以被诱导分化为脂肪细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晓牧	江西省人民医院中心实验室	171	1029	15.0	24.0
2	易敬林	江西省人民医院眼科	46	204	8.0	12.0
3	丁伟荣	江西省人民医院中心实验室	19	84	5.0	8.0
4	何丹	江西省人民医院中心实验室	17	115	6.0	10.0
5	杨海军	江西省人民医院眼科	15	80	5.0	8.0
6	柳喆	江西省人民医院中心实验室	12	83	6.0	9.0
7	杨志刚	江西省人民医院中心实验室	6	44	4.0	6.0
8	陈波	江西省人民医院中心实验室	1	22	1.0	1.0