K562细胞总RNA转染对人树突状细胞抗原提呈、成熟及功能影响的初步研究

• 作者: 刘嬿 聂晓绚 范华骅 陆华中 陈波斌 高峰 高跞 龚裕春
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 K562细胞 总RNA 转染
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 379-383
• 页数: 5页
• 分类号: R392|R735.3
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2005.05.007

摘要

探讨人的树突状细胞(dendritic cell,DC)体外经K562细胞株总RNA转染后,能否诱导出p210蛋白表达,并诱导特异性CTL,为DC疫苗的临床应用提供理论基础.自健康人浓缩白细胞制剂分离有黏附特性的单核细胞,经GM-CSF、IL-4培养5 d后,获得未成熟的DC(imDC);体外以脂质体DOTAP或直接电穿孔转染K562细胞总RNA.抽提后即时以及转染24 h后的DC内RNA进行RT-PCR检测,Western blot分析p210蛋白表达,流式细胞仪检测,以及诱导CTL杀伤K562细胞功能检测等.结果显示,RT-PCR检测表明:DC经K562细胞总RNA转染后,细胞内出现Bcr-Abl的cDNA条带,24 h后消失.Western blot实验表明:转染24 h后,开始表达p210特征性蛋白.与对照组相比,转染K562细胞总RNA的DC,在24 h后CD80、CD83、CD86、HLA-DR等表面标志均不同程度表达增高,并可促进T细胞对K562的杀伤活性.该研究从多方面角度说明应用肿瘤总RNA负载DC来制备DC疫苗的可行性,提示改良的DC疫苗抗肿瘤可能的应用前景.