潮霉素和新霉素抗性基因转基因小鼠的建立及其表达研究

• 作者: 严兰珍 党素英 孙霞 王铸钢 麻孙恺
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 潮霉素抗性基因 新霉素抗性基因 转基因小鼠 小鼠胚胎成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 159-162
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.01.029

摘要

建立潮霉素(hygromycin,hyg)和新霉素(neomycin,neo)抗性基因转基因小鼠系,以获得两种抗性基因同时表达的小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs),为条件性基因剔除或小鼠胚胎干细胞克隆的筛选创造条件.将pTK-hygR-pA,PGK-neoR-pA两个转录单元分别克隆至pBluescript载体中获得hygR-neoR双抗性基因表达质粒,以Kpn Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切,回收4245bp串联基因片段,经显微注射获得HygR-neoR转基因小鼠.PCR及Southern blot鉴定转基因小鼠基因型;RT-PCR检测hygR、neoR基因在转基因阳性小鼠组织及MEFs中的表达.经显微注射共获得7只转基因阳性小鼠(Founders,G0代),经交配繁育,建立了6个转基因小鼠系.RT-PCR检测其中5个转基因阳性小鼠系F1代杂合子成年雌性小鼠肝脏、卵巢组织中hygR、neoR基因的表达,发现hn30,hn33,hn66和hn67系阳性小鼠的1种或2种组织中有hygR、neoR的表达;RT-PCR检测发现hyg和neo抗性基因在从h30和hn66系分离培养的MEFs中表达.通过显微注射,建立了表达hyg-neo抗性基因的转基因小鼠系,转基因表达检测发现两个转基因小鼠系的胚胎成纤维细胞中表达双抗性基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王铸钢		20	95	6.0	9.0
3	严兰珍		3	21	3.0	3.0
6	孙霞		5	15	3.0	3.0
7	麻孙恺		4	15	2.0	3.0
8	党素英		1	3	1.0	1.0