潮霉素抗性3T3细胞的建立和鉴定

• 作者: 张梅英 李华 杨葳 王太一 王禄增 董婉维
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 3T3 细胞 潮霉素 饲养层 ES细胞
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 163-165
• 页数: 3页
• 分类号: Q813
• 字数: 2440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2004.03.008

摘要

目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE-Ins-human)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层.方法通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因的质粒pHyg导入3T3细胞中,利用潮霉素的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果经500 μg/ml的潮霉素压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了潮霉素抗性的3T3细胞,为进行目的基因(pTRE-Ins-human)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禄增	中国医科大学实验动物部	73	713	14.0	23.0
2	董婉维	中国医科大学实验动物部	38	293	11.0	16.0
3	张梅英	中国医科大学实验动物部	41	186	7.0	12.0
4	王太一	中国医科大学实验动物部	30	279	9.0	16.0
5	杨葳	中国医科大学实验动物部	29	100	6.0	8.0
6	李华	中国医科大学实验动物部	56	397	12.0	18.0