雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态和分泌功能的影响

• 作者: 刘迎九 尹洪超 张国娟 李航 李金红 陶建瓴
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 雷帕霉素 3T3-L1前脂肪细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 瘦素 胆固醇
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 560-565
• 分类号: R589.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2011.05.016

摘要

目的 探讨雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态、分泌功能的影响,阐明雷帕霉素引起高脂血症的可能机制.方法 体外培养前脂肪细胞3T3-L1细胞株,分成对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组.用油红O染色(定性)及高效液相色谱法(定量)检测3T3-L1细胞内胆固醇水平,酶联免疫吸附实验分析瘦素、脂联素的分泌量,实时荧光定量PCR法及Western blot法检测3T3-L1细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA和蛋白的表达.结果 油红O染色显示雷帕霉素组脂肪细胞脂滴数量较对照组明显减少；对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组细胞内游离胆固醇含量分别为(12.89±0.16)、(9.84±0.45)、(9.39 ±0.46)和(8.61 ±0.34) mg/ml,与对照组相比,雷帕霉素能抑制3T3-L1前脂肪细胞内胆固醇的蓄积(P＜0.05).对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组瘦素分泌量分别为(19.02±0.52)、(16.98±0.01)、(15.62±0.01)和(13.84±0.66)ng/ml,与对照组相比,雷帕霉素能减少成熟后3T3-LI脂肪细胞瘦素的分泌水平(P＜0.05).雷帕霉素50、100及200 nmol/L组PPARγ mRNA表达量分别为对照组的94％、62％和47％,均显著低于对照组(P＜0.05)；PPARγ蛋白表达量分别为对照组的80％、74％和61％,均显著低于对照组(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,检测PPARγmRNA的表达分别为对照组的(0.60±0.14)、(0.67 ±0.03)和(1.30±0.14)倍,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05); PPARγ蛋白表达与mRNA的表达变化趋势相似,差异具有统计学意义(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,ELISA检测各处理组瘦素表达量分别为(19.02 ±0.52)、(15.62 ±0.10)、(14.45±1.01)和(18.07 ±0.66) ng/ml,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 雷帕霉素通过下调PPARγ的表达减少脂肪细胞内的脂质蓄积,并且抑制其瘦素分泌,这为临床上雷帕霉素引起的高脂血症提供了一个可能的解释.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李航	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科	60	450	12.0	19.0
2	陶建瓴	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科	5	15	2.0	3.0
3	尹洪超	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理系	13	72	5.0	8.0
4	刘迎九	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科	2	5	2.0	2.0
5	张国娟	北京同仁医院肾内科	2	5	2.0	2.0
6	李金红	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肾内科	1	2	1.0	1.0