人核糖核酸酶抑制因子对小鼠B16黑素瘤的基因治疗研究

• 作者: 刘亚斌 孙琳 崔秀云 张良 李静 杨明杰 王艇 田余祥 黄俊
• 来源期刊: 实用肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤,实验性/治疗 蛋白质类 转染 基因疗法
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础与临床研究
• 页码范围: 107-111
• 页数: 5页
• 分类号: R739.5
• 字数: 3572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1692.2005.02.007

摘要

目的观察人核糖核酸酶抑制因子(RI)逆转录病毒真核表达载体(pLNCX-ri)对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用.方法将转染细胞PA317-pLNCX和PA317-pLNCX-ri分别置于DMEM培养基上,经G418筛选培养.用Sepharose CL-4B凝胶过滤层析纯化病毒颗粒.经G418筛选培养,在倒置相差显微镜下计数克隆细胞数.用RT-PCR方法和Western blotting方法检测被感染的NIH3T3细胞及B16黑素瘤组织中RI基因的表达.给接种B16黑素瘤细胞的C57BL/6J小鼠分别皮下注射纯化的pLNCX-ri病毒和空载体病毒,观察C57BL/6J小鼠肿瘤的生长状况,并对肿瘤组织称重.镜下观察肿瘤组织切片的血管密度.结果 RI在感染了pLNCX-ri病毒的NIH3T3细胞和B16黑素瘤组织中得到有效表达.pLNCX-ri病毒治疗组的瘤组织重量(0.60±0.26)g明显低于pLNCX病毒对照组(1.84±1.64 )g(P<0.01)和生理盐水对照组(1.77±1.13 )g(P<0.01).pLNCX病毒对照组(1.84±1.64 ) g和生理盐水对照组(1.77±1.13 ) g无显著性差异(P>0.05).与pLNCX病毒对照组和生理盐水对照组相比,pLNCX-ri病毒治疗组肿瘤组织的血管密度明显减少,而两对照组间无明显差异.结论人核糖核酸酶抑制因子(RI)对小鼠B16黑素瘤的生长有明显的抑制作用.