反义肽核酸阻断人神经母细胞瘤多药耐药相关蛋白P-糖蛋白的表达

• 作者: 刘福生 卞继峰 孔建新 张健 张庆林 王成伟 郭华 马道新
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 神经母细胞瘤 多药耐药性 肽核酸 反义
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 300-304
• 页数: 5页
• 分类号: R73-36+2
• 语种: 中文

摘要

目的探讨反义肽核酸(PNA)的细胞转染方法及其对体外培养的神经母细胞瘤多药耐药(MDR)相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法以人MDR-1基因mRNA为靶点设计合成两反义PNA序列,利用PNA-DNA杂交,阳离子脂质体介导转染神经母细胞瘤耐药细胞株SK-N-SH.采用流式细胞术、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和高效液相色谱等方法分别检测反义PNA的转染效率,转染前后细胞P-gp、MDR-1基因mRNA的表达及细胞内阿霉素(ADM)浓度.结果荧光标记的反义PNA转染肿瘤细胞后,细胞平均荧光强度显著增强,呈浓度依赖性.两反义PNA均使SK-N-SH细胞P-gp表达明显降低,MDR-1 mRNA表达轻度降低,细胞内ADM聚集浓度明显增加.结论PNA-DNA杂交阳离子脂质体转染法可有效增加细胞对PNA的摄取,特异序列的反义PNA可在一定程度上阻断神经母细胞瘤MDR相关蛋白P-gp的表达.