肺炎支原体重组蛋白抗原的初步鉴定

• 作者: 刘忠顺 宋焕景 李保强 王桂珍 董占双 赵芝娜
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎支原体 P1黏附因子 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-37
• 页数: 3页
• 分类号: R375+.2
• 字数: 2359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2005.06.009

摘要

克隆并表达肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1黏附蛋白D-2区基因片段,进而对重组蛋白的抗原特异性进行鉴定.应用PCR技术获取目的基因片段,并构建含有目的基因片段的重组质粒,用重组质粒酶切图谱法、PCR扩增及核苷酸测序方法鉴定重组质粒.而后将其转入大肠杆菌BL21菌株,用IPTG诱导目的基因表达,用SDS-PAGE分析重组蛋白的相对分子量,免疫印迹实验鉴定其免疫反应性,并用ELISA实验测定重组蛋白抗原的特异性.结果重组质粒中的p1基因片段经测序后,与GenBank中p1基因核苷酸序列比较,其同源性为99.66%～100%;经SDS-PAGE分析,重组蛋白的相对分子量约为 59 ku;免疫印迹实验和ELISA实验证实,Mp免疫血清和Mp感染患者血清都能与重组蛋白发生特异反应.研究中的含P1黏附因子D-2区基因的重组质粒已成功构建,其表达的重组蛋白具有特异的免疫反应性,初步ELISA实验证实,本研究获得的重组蛋白可用于临床标本检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王桂珍	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	33	103	6.0	8.0
2	李保强	解放军202医院检验科	2	0	0.0	0.0
3	董占双	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	13	52	3.0	7.0
4	刘忠顺	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	8	13	2.0	3.0
5	赵芝娜	沈阳药科大学微生物与细胞生物学教研室	6	55	2.0	6.0
6	宋焕景	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	2	9	1.0	2.0