甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白的分离、纯化和鉴定

• 作者: 冯英凯 周长喜 徐剑铖 毛宝龄 胡明冬 龚传明
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型副伤寒沙门菌 鞭毛蛋白 鉴定 AKTA Explorer蛋白纯化系统
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 599-603
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.07.021

摘要

目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定. 方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTA Explorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化.纯化的蛋白用SDS-PAGE、Western blot和磷钨酸负染扫描电子显微镜(scanning electron microcopy, SEM)观察并摄片鉴定.考马斯亮蓝法测定所获得鞭毛蛋白的产量. 结果 SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为52×103蛋白带;免疫印迹试验亦提示条带在Mr 52×103处; SEM观察发现该鞭毛蛋白呈丝状;三者均证实该蛋白为同一均质蛋白.蛋白定量测得每克湿重的细菌可提取(4.8±0.5)mg鞭毛蛋白. 结论经酸裂解法可获得高产量的鞭毛蛋白,且易于纯化和鉴定.