RNA干扰技术对人U937巨噬细胞株糖皮质激素受体表达及功能的抑制效应

• 作者: 张芳 苏踊跃 钱桂生 陈维中
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 糖皮质激素受体 人巨噬细胞株U937 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 951-953
• 页数: 3页
• 分类号: R392.12|R394-33|R394.3
• 字数: 2891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.10.006

摘要

目的利用载体介导的RNA干扰技术,建立糖皮质激素受体(GR)基因阻断的人U937巨噬细胞株模型.方法构建两个针对GR的RNAi重组表达载体,分别命名为pSilencer 3.1-GR1和pSilencer 3.1-GR2,经测序确认后,转染人U937巨噬细胞株.RT-PCR、Western blot分别检测糖皮质激素受体mRNA水平和蛋白水平表达变化;相对荧光素酶活性法检测地塞米松作用后GR转录激活功能的变化.结果经测序证实:成功构建两个针对GR的RNAi表达载体(pSilencer 3.1-GR1和pSilencer 3.1-GR2);转染pSilencer 3.1-GR2可明显降低细胞内GR mRNA的丰度及GR蛋白表达,细胞内GR转录激活功能明显降低;转染pSilencer 3.1-GR1与对照组相比无显著变化.结论成功地构建并筛选出一个高效且特异阻断GR表达及功能的RNAi质粒表达载体,为进一步研究糖皮质激素受体的功能提供新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张芳		1	1	1.0	1.0
2	钱桂生		8	31	3.0	5.0
3	陈维中		1	1	1.0	1.0