C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响

• 作者: 邱鹏新 颜光美 马涛
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛇毒纤溶酶,重组 金属蛋白酶 C端序列 删除
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 404-408
• 页数: 5页
• 分类号: Q959.6|Q55|R996.3
• 字数: 3412字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2005.04.012

摘要

[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱鹏新	中山大学基础医学院药理学教研室	42	205	7.0	12.0
2	颜光美	中山大学基础医学院药理学教研室	38	166	7.0	10.0
3	马涛	中山大学基础医学院药理学教研室	6	25	2.0	5.0