人TACI-Fc融合蛋白对XG6细胞体外生长的调节作用

• 作者: 张学光 徐海燕 徐颖 於葛华 施勤 王泳 马泓冰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TACI-Fc融合蛋白 基因转染细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 912-916
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.11.013

摘要

目的建立人TACI-Fc基因转染细胞,获得该融合蛋白,研究其对多发性骨髓瘤细胞系XG6的生物学作用.方法利用RT-PCR方法从扁桃体细胞中克隆全长TACI cDNA片段,将该基因的胞外段sTACI与人IgG1 Fc段连接到pcDNA真核表达载体上,使两者融合表达.脂质体法将重组质粒pcDNA-sTACI-Fc转入小鼠成纤维细胞系L929,ELISA法测定转染TACI-Fc基因的L929细胞培养上清中TACI-Fc的含量,培养上清经亲和层析柱纯化,获得纯化的融合蛋白TACI-Fc.然后应用台盼蓝染色活细胞计数和3H-TdR掺入法检测其对XG6细胞的生长和增殖的调节作用.结果经RT-PCR和ELISA方法检测表明,成功构建了稳定表达sTACI-Fc融合蛋白的基因转染细胞.基因转染细胞的培养上清经亲和层析柱纯化,得到TACI-Fc融合蛋白.体外检测其生物学活性结果表明,该融合蛋白可有效地阻断Blys对骨髓瘤细胞株XG6的促增殖作用.结论本实验成功地将TACI胞外段与人IgG1 Fc段在真核细胞中进行融合表达,表达的蛋白质具有良好的生物学功能,这为进一步对TACI基因进行功能研究奠定了物质基础.