热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化

• 作者: 周欣阳 张天一 林琳 牛纪晓 顾君一
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSP gp96-肽复合物 纯化 H22肝癌 小鼠
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 690-693
• 页数: 4页
• 分类号: R730.51
• 字数: 4509字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立从H22肝癌细胞中提取、纯化热休克蛋白gp96-肽复合物的方法.方法:①制备H22肝癌细胞蛋白:将H22肝癌细胞裂解、离心、过滤及透析后获得.②gp96-肽复合物的纯化:上述可溶性H22肝癌细胞蛋白经分级硫酸铵盐析后,依次用ConA-Sepharose亲和层析、Sephadex G25更换缓冲液及DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化.③gp96-肽复合物的鉴定和浓度测定:所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子量及性质鉴定,Lowry法测定蛋白浓度.结果:分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染鉴定为单一带,分子量为96 kD;Western blot结果证实为HSP gp96.每20 ml 压积H22细胞最终获得1 mg的HSP gp96.结论:使用本分离纯化方法可获得高纯度HSP gp96肽复合物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾君一	南通大学神经再生重点实验室分析细胞学研究室	12	37	4.0	5.0
2	张天一	南通大学神经再生重点实验室分析细胞学研究室	49	277	8.0	14.0
3	林琳	南通大学神经再生重点实验室分析细胞学研究室	22	72	4.0	7.0
4	周欣阳	南通大学神经再生重点实验室分析细胞学研究室	9	29	4.0	4.0
5	牛纪晓	协和医科大学基础学院	1	4	1.0	1.0